Caracterizacion de la captacion de hierro heminico en celulas tipo epitelio intestinal CACO-2. II. Mecanismo de captacion y efecto del citoesqueleto.

Abstract

Existen pocos estudios sobre el mecanismo de captación de Fe hemínico a nivel intestinal. Actualmente se postulan dos tendencias que permitirían el ingreso del Fe hemínico a la célula: a) captación mediada por receptor y b) difusión pasiva. Por otro lado, no existen estudios que hagan referencia a las implicancias del citoesqueleto en el proceso de ingreso del heme al enterocito. El objetivo de este trabajo fue caracterizar la captación de Fe hemínico y estudiar la participación del citoesqueleto en este proceso. Para ello, en la línea celular tipo epitelio intestinal Caco-2, se estudió el proceso de endocitosis mediada por receptor y de difusión pasiva, utilizando inhibidores de citoesqueleto y del proceso de endocitosis. La absorción de Fe hemínico (expresada como nmoles Fe/mg proteína) disminuyó al incubar las células en presencia de tripsina (5,8 a 3,4) (p < 0,05). Sin embargo, la captación de Fe hemínico aumentó con respecto al control al incubar las células con óxido de fenilarsina (1,9 a 7,7) o metil-β-ciclodextrina (1,9 a 5,5) (p < 0,01). Al incubar las células con Nocodazol o Colchicina no hubo cambio significativo en la captación de Fe hemínico, sin embargo, aumentó (3,3 a 8,0) en presencia de citocalasina D (p < 0,01) y disminuyó en resencia de Brefeldina A (3,26 a 1,36) (p < 0,05). Estos resultados muestran que en la captación de heme por el enterocito es un proceso mediado por proteína y sería un sistema diferente a la endocitosis mediada por receptor y a la difusión simple. También se encontró que en la absorción del heme no están implicados los microtúbulos mientras que es de gran importancia los filamentos de actina. Financiamiento: Proyecto Fondecyt 1030633, TM Fernando Pizarro, Laboratorio de icronutrientes, INTA, Universidad de Chile.